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磷脂酶A2PLA2微量法检测试剂盒实验通用规则

2022-05-19

磷脂酶A2PLA2微量法检测试剂盒实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。

测定意义:
磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,广泛存在于动植物组织、、细胞核分泌物中,参与脂肪消化,精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程,在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

测定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC)产生游离巯基,与DTNB反应生成黄色物质,在412nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、微量石英比色皿。。

Kelch样蛋白8抗体
钾离子通道蛋白家族KCNQ2抗体
钾离子通道多聚体结构域蛋白7抗体
钾通道蛋白1抗体
电压门控钾通道蛋白1抗体
微管驱动蛋白家族成员1A抗体
钾离子通道蛋白家族成员1抗体
钾离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体
钾离子通道蛋白家族成员2抗体
G蛋白激活内向钾通道5抗体
钾离子通道多聚体结构域蛋白12抗体
抑癌蛋白EZH2抗体
DNA修复酶Ku70抗体
DNA修复酶Ku-80抗体
14号染色体开放阅读框106抗体
脑蛋白9抗体
钾通道相互作用蛋白2抗体
剑蛋白p60亚基A1抗体
Kazrin蛋白抗体
钾离子通道多聚体结构域蛋白8抗体
磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体
氯胺酮抗体
激肽释放酶7抗体