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海藻糖酶(TREH)真核蛋白蛋白表达及纯化

2023-05-11
海藻糖酶(TREH)真核蛋白蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

样品要求:

1、待标记样品需保证90%以上的纯度,样品中不含有干扰标记物结合的成分,如有特殊成分,请提前标注说明。

2、待标记样品最小标记量为1mg,最好是干粉,如果是液体,浓度应大于1mg/ml。

3、抗体IgG样品中应不含BSA、叠氮钠成分。


4、大分子蛋白应提供分子量、等电点、缓冲液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物还需提供分子结构式。

5、请提前说明任何特殊情况。
布氏肉汤
Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
高氏合成1号琼脂培养基
血平板 (成品培养基)
哥伦比亚血平板(成品培养基)
改良克氏双糖培养基
硝酸盐蛋白胨水培养基
半固体琼脂
3%氯化钠三糖铁琼脂
血琼脂培养基基础
苯丙氨酸培养基
葡萄糖铵培养基
尿素琼脂培养基基础
缓冲动力-硝酸盐培养基
动力—硝酸盐培养基(A法)
明胶培养基(营养明胶)
克氏双糖铁琼脂
缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)
Koser氏枸椽酸盐肉汤
西蒙氏柠檬酸盐培养基
蛋白胨水 (靛基质培养基)
糖发酵培养基基础
氨基酸脱羧酶试验基础培养基
三糖铁琼脂培养基(TSI)药典