Ar 1193 电击感受态细胞-上海帛科生物技术有限公司

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Ar 1193 电击感受态细胞

2021-02-21

产品详情

产地进口、国产
价格：1250
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简介
规格参数：

产品名称：Ar 1193 电击感受态细胞
规格：50ul*10 50ul*50
分类：发根农杆菌感受态细胞
用途：生化试剂（用于科研试验研究）
储存条件: -70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。
外观:（性状）干冰运输，单加10kg干冰费
单位: 袋

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

原（标准品）质量规格：UV>95%,分析标准品Procyanidin ELISAKitcTn-Ⅰ人心肌肌钙蛋白Ⅰ规格：48T/96T 凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA试剂盒，英文名： FⅧ ELISA Kit

胡椒碱质量规格：HPLC>97%,BRPiperine 小鼠谷酸脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA试剂盒，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit Rabbitoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA试剂盒兔子氧化(OxLDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

透明质酸,玻尿酸(分子量80万-150万)质量规格：>95%,BR,M.W:80万-150万Hyaluronic Acid   大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA检测试剂盒Ratai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISA试剂盒人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)ELISA试剂盒规格：96T/48T

透明质酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量3K）质量规格：>95%,BR,M.W:3000Hyaluronic Acid   人白细胞活化黏附因子(ALCAM)试剂盒 Human ALCAM ELISA Kit HumanComplemefragme3c，C3cELISAKit人补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISA试剂盒小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒规格：96T/48T 34420-19-4千金子二萜醇厂家 Lathyrol

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒，英文名： ELA2 ELISA Kit 88206-46-6羌活醇说明书 Notopterol

犬球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒CanineImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T 78281-02-4羟基红花黄色素A品牌 Hydroxysafflor yellow A

犬软骨寡聚基质蛋白(COMP)试剂盒 Dog cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit 34540-22-2羟基积雪草苷规格 Madecassoside

英文名称HumanFree-T4ELISAKit人游离甲状腺素(Free-T4)规格：96T/48T 18449-41-7羟基积雪草酸厂家 Madecassic acid

484-12-8蛇床子素厂家   Osthole 植物葡萄糖6-1酸异构酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)电泳分析试剂盒5

483-90-9毛两面针素规格 Toddalolactone 植物尿苷二1酸葡萄糖焦1酸化酶(UDPglucosepyrophosphorylase)活性比色法定量检测试剂盒20

483-15-8二氢小檗碱厂家 Dihydroberberine   植物内质网粗提分离试剂盒10

Ar 1193 电击感受态细胞482-89-3靛蓝厂家 Indigo   植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制备试剂盒20

482-83-7黄檀素说明书 6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin    植物弥散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量检测试剂盒(包括萃取)20

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