实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

中文名称   方法   规格              Clopidogrel bisulfate  中文名：硫酸氢氯吡格雷  分子式：C16H18ClNO6S2 

中文名称   方法   规格              5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4 

致病性大肠杆菌(EPEC)*试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T  Topiramate  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S  度：98.0%

质粒中量提取试剂盒   Plasmid Exaction Kit  Torososide A  165689-32-7  中文名：  分子式：C38H32O15  度：%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

质粒中量提取试剂盒   50T  trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名：  分子式：C6H13NO  度：98.0%  关键词：
EB病毒转化的B细胞;KM933盐酸育亨宾质量规格：>98%,BRYohimbine HCl

CD3E Others Human  CD3e / CD3 epsilon 细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸育亨宾（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Yohimbine HCl

脐带间质干细胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells硼标准溶液（100μg/mL,基体：水）质量规格：100μg/mL,基体：水Boron solution

Saos-2细胞，成细胞 鲜绿青霉 二倍体细胞;HEL铋标准溶液（1000μg/ml,溶剂:1.5 mol/L HNO3）质量规格：1000μg/ml,溶剂:1.5 mol/L HNO3Bismuth solution

T/G HA-VSMC(平滑肌细胞) 5×106cells/瓶×2铜标准溶液（1000mg/l,溶剂：1%硫酸）质量规格：1000mg/l,溶剂：1%硫酸Copper solution
内根壳细胞总RNAHHIRSC NA二乙基锡(标准品)Diethyltin-dichloride质量规格：分析标准品,10ng/μl溶于

VEGFA Others Rat 大鼠 VEGF164 / VEGFA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 草萘胺(标准品)Napropamid质量规格：分析标准品

中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr-除虫脲标准溶液(10μg/ml,u=3%)Diflubenzuron solution质量规格：10μg/ml,u=3%

NCI-H460[H460]细胞，大细胞细胞 ,H4细胞 小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32二噻农(标准品)Dithianon质量规格：分析标准品

小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP棉隆(标准品)Dazomet质量规格：分析标准品,97%
Echinoynethiophene A  中文名：  分子式：C13H10O2S    猪C反应蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ecdysterone 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C30H48O7    猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dyphylline  中文名：二羟丙茶碱  分子式：C10H14N4O4    猪热休克蛋白40elisa试剂盒   猪热休克蛋白40试剂盒   规格型号：96T/48T   猪热休克蛋白40试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪热休克蛋白40试剂盒、猪热休克蛋白40eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Duloxetine   中文名：盐酸度洛西汀  分子式：C18H20ClNOS    猪热休克蛋白20elisa试剂盒   猪热休克蛋白20试剂盒   规格型号：96T/48T   猪热休克蛋白20试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪热休克蛋白20试剂盒、猪热休克蛋白20eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

裸盖鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒D-Tryptophan methyl ester   中文名：  分子式：C12H15ClN2O2    猪去甲上腺素elisa试剂盒   猪去甲上腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   猪去甲上腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪去甲上腺素试剂盒、猪去甲上腺素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。